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南芥菜花葉病毒防治

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來(lái)源：作者：發(fā)布時(shí)間：2013-07-23 16:33

南芥菜花葉病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)屬豇豆花葉病毒科Comoviridaex線蟲(chóng)傳多面體病毒屬Nepovirus,是我國(guó)二類檢疫性植物病毒,在世界各地都有分布,寄主范圍也較廣,約有170多屬、200多種,包括了蔬菜、瓜果、花卉、豆類等幾大類經(jīng)濟(jì)作物,近年檢疫部門(mén)就曾在進(jìn)口的葡萄種苗、水仙球莖[和郁金香球莖上檢測(cè)出該病毒。我國(guó)幅員遼闊,氣候條件的復(fù)雜多樣性,使得有些地區(qū)的氣候狀況很可能適宜ArMV的繁殖,為了防止ArMV傳入我國(guó)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,最有效的方法就是建立快速準(zhǔn)確的檢測(cè)方法,目前對(duì)ArMV的檢測(cè)主要是采用酶聯(lián)免疫法。
基本信息
　　學(xué)名 Arabis mosaic nepo virous
　　異名 Raspberry yellow dwarf virus ,Rhabarber mosaic virus (rhubarb mosaic virus)
　　英文名 Arabis mosaic nepo virous
　　分類地位線蟲(chóng)等多面體病毒組
　　分布：ARMV主要發(fā)生在比利時(shí)，保加利亞，前捷克斯洛伐克，丹麥、法國(guó)、德國(guó)、匈亞利、愛(ài)爾蘭、意大利、盧森堡、荷蘭、波蘭、羅馬尼亞、瑞典、瑞士、英國(guó)、前蘇聯(lián)、前南斯拉夫、日本、南非、加拿大、澳大利亞和新西蘭

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寄主植物
　　約174屬，215種。為害主要作物有黃瓜、萵苣、芹菜、胡蘿卜、蘆葦、香石竹、水仙、郁金香、茉莉、唐菖蒲、卷丹、月季、常春滕、矮牽牛、福綠考、瑞香、大麻、薄荷、啤酒花、甜菜、煙草、草木樨、櫻桃、桃、葡萄、草莓、懸鉤子、大簧、辣根、西洋接骨木、樹(shù)番茄、白蠟樹(shù)、橄欖、玫瑰、紅醋栗、馬鈴薯、菠菜、白菜、花椰菜、蕪菁、芥菜、菜豆、豇豆、蠶豆、碗豆、大豆等。
　　ARMV自然侵染野生和栽培的單子葉、雙子葉植物，人工機(jī)械接種能侵染28科93種雙子葉植物。ARMV還能侵染裸子植物美國(guó)扁柏的根，也能侵染草本試驗(yàn)寄主，但不同分離物致病性有差異。
　　鑒別寄主：莧色藜、昆諾阿藜、黃瓜、煙草、菜豆、矮牽牛
　　繁殖寄主：矮牽牛、光里夫氏煙
　　試驗(yàn)寄主：莧色藜、黃瓜
　　主要寄主：草霉、啤酒花、芍藥屬、懸鉤子、大黃屬和接骨木
　　其它寄主：于甘菜、芹菜、水仙、歐洲女、辣根、自三葉草、唐昌蒲屬、辣椒、萵苣、以及一些栽培品種和野生品種。
鑒定特性
　　葡萄上表現(xiàn)"軟皮"和莖溝槽癥狀。懸鉤子黃矮。草莓花葉和黃化縐縮。黃瓜上病葉表現(xiàn)黃色斑點(diǎn)，綠色部分呈不正常的黑色，花"軟木化"并且不形成果實(shí)。萵苣上表現(xiàn)為矮化，褪綠，壞死和心部退化。啤酒花（蛇麻草）根部表現(xiàn)為不正常的黑色，且葉子變小。樹(shù)番茄上早春表現(xiàn)為輕微褪綠環(huán)斑駁，以后隨著季節(jié)的延續(xù)逐漸消失，果實(shí)癥狀為黃色褪綠斑駁。歐洲白蠟樹(shù)的葉子上表現(xiàn)為褪綠斑駁，葉形呈鋸齒狀或櫟樹(shù)葉狀。煙草表現(xiàn)環(huán)斑，葉片缺刻破損，心葉卷曲。

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危害情況
　　ArMV為RNA等徑粒子,直徑為30nm,分生在歐洲,寄主范圍廣,侵染許多寄主植物的種子,易汁液傳播.由線蟲(chóng)Xiphinema diversican datum 傳播。
　　主要表現(xiàn)為葉片斑駁、點(diǎn)斑、矮化以及畸形（包括耳突），不同寄主上的癥狀表現(xiàn)不同，而且隨株系，栽培品種、季節(jié)以及年份不同而變化。
　　ARMV引起懸鉤子黃矮，草霉花葉黃皺葉，黃瓜矮化斑駁，萵苣褪綠、矮化，芹菜矮化壞死，連翹黃果，大黃花葉癥狀。ARMV在很多植物上引起癥狀，包括甜菜啤酒花，辣根，水仙，玫瑰，歐洲女貞、白三葉草，芍藥屬等。芍藥屬植物感染此病毒很普遍，包括芍藥扇葉病毒。芍藥扇葉病毒與南芥菜花葉病毒血清學(xué)有差異。ARMV與李矮縮病毒或者李屬壞死環(huán)斑病毒混合侵染櫻桃，產(chǎn)生“櫻桃銼葉病”。
形態(tài)特征
　　粒子特性：
　　ARMV粒子等大，有三種沉降組份：外殼蛋白T組份，和兩個(gè)核蛋白組份(M和B)。T ，M， B沉降系數(shù)：53，93，126。
　　粒子結(jié)構(gòu)：
　　病毒粒子等徑，直徑為30nm，五或六角形，外殼蛋白由42個(gè)亞基組成，負(fù)染色后電鏡下觀察到有些粒子是完整的，有些是部分的，有些無(wú)插入，可能對(duì)應(yīng)于T,M,B組份。

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　　粒子組份：
　　ARMV是單鏈RNA雙分體基因組病毒，兩種RNA分別為和，分別占粒子重量的和。蛋白質(zhì)：外殼蛋白分子量為。
　　株系：
　　許多分離物除致病性有微小差異外，其它與典型摸學(xué)沒(méi)有區(qū)別。而啤酒花株系只侵染草本試驗(yàn)寄主中的莧色藜和昆藜，血清學(xué)上與典型株系有差異。
生物學(xué)特性
　　病毒粒體為球狀正二十面體，直徑為25～30nm，外觀有５或６個(gè)角，蛋白質(zhì)外殼有42個(gè)形態(tài)亞基組成。ArMV為單鏈RNA病毒，核酸大約占粒體重的27%(M)和41%(B)，RNA基本比率為A=24.9%，C=25.6%，G=21.6%， U=27.9%。
　　蔗糖密度梯度離心后，病毒制劑可分為三層，最上層(T)為蛋白外殼，沒(méi)有侵染性，而下面兩層（Ｍ和Ｂ）有侵染性，且顯示出典型的核蛋白吸收光譜。 A2650/A280比率底部成分為1.71±0.03，頂部成分為1.56±0.06。沉降系數(shù)為 53S(T)、93S(M)、126S(B)。
　　矮牽牛的病汁液致死溫度為55～61℃，稀釋終點(diǎn)為10－3～10－5，體外存活期室溫下為1～2周，有些毒株在室溫下汁液的存活時(shí)間較長(zhǎng)。
　　株系有葡萄株系（典型株系），黃瓜株系，水仙株系，卷丹株系，啤酒花株系和白芷株系。中國(guó)苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com
　　ArMV有較強(qiáng)的免疫原性，注射兔子可獲得滴度較高的抗血清，應(yīng)用細(xì)胞融合技術(shù)已獲得了單克隆抗體。
生物學(xué)
　　穩(wěn)定性：
　　矮牽牛感病汁液，55～61 ，放10分鐘，室溫下存放1～2星期或稀釋倍后，病毒喪失侵染性。有些株系室溫下存活期稍長(zhǎng)。
　　血清學(xué)：的抗血清較易獲得，試管沉定試驗(yàn)，微沉定試驗(yàn)，1％凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)效果都不錯(cuò)，膠擴(kuò)散試驗(yàn)中，病毒產(chǎn)生一條沉淀線。
　　相關(guān)性：
　　通過(guò)血清學(xué)測(cè)試，ARMV大多株系間存在近緣血清學(xué)關(guān)系。啤酒花線形株系在膠擴(kuò)散試驗(yàn)中與模式株系有差異，但差異程度未見(jiàn)報(bào)道。Harrison(1958)發(fā)現(xiàn)ARMV不同株系間有交叉保護(hù)現(xiàn)象，但Jha(D1961)認(rèn)為交叉保護(hù)是不完全的。 Schmelzer(1963)發(fā)現(xiàn)南芥菜花中病毒間交叉保護(hù)現(xiàn)象比番茄黑環(huán)病毒間的交叉保護(hù)現(xiàn)象強(qiáng)。ArMV與芍藥扇葉病毒（grapevine fanleaf virus,GVFLV）有遠(yuǎn)緣血清關(guān)系。
傳播途徑
　　介體傳播：
　　模式株系由土壤線蟲(chóng)Xiphinema diversicaudatum 和X.coxi傳播。X.diversicauolatum的幼蟲(chóng)和線蟲(chóng)都能傳播ARMV，但線蟲(chóng)不能自母代傳王子代，且病毒隨線蟲(chóng)脫皮而排除。線蟲(chóng)從受侵染植物根部獲毒只需一天（獲毒伺育期一天），接毒伺育期為三天。線蟲(chóng)在休耕土壤中生長(zhǎng)可保毒至少31天，在對(duì)ArMV免疫的懸鉤子品種中可持毒8個(gè)月以上。中國(guó)苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com
　　種子傳播：
　　至少有12科15種植物能通過(guò)種子傳播ArMV，有些寄主中，10%以上甚至100%傳給后代。許多植物種傳獲侵染后，癥狀不明顯，對(duì)于無(wú)性繁殖的農(nóng)作物如啤酒花、芍藥等，這種傳播途徑不重要。
　　其它的傳播途徑：植物無(wú)性繁殖材料是該病毒最主要的傳播途徑。種植期間，ArMV侵染可能是隨機(jī)分布的，也可能是呈塊分布，或者兩者都有，隨機(jī)分布是由于使用了部分受害植物材料恩賜塊分布是因?yàn)閭鞫揪€蟲(chóng)在土壤中不規(guī)則分布，或由于種用部分受害植物材料使獲毒的線蟲(chóng)分布不均所至。
　　在田間，很少發(fā)現(xiàn)該病毒在植物間的接觸傳播，盡管在啤酒花上發(fā)現(xiàn)花粉傳染現(xiàn)象，但沒(méi)有證據(jù)說(shuō)明帶毒花粉能夠侵染健康植株。
　　對(duì)于非栽培植物，首先是種子傳毒，其次是通過(guò)線蟲(chóng)進(jìn)行短距離的傳播。
檢疫與防治
　　檢疫方法：
　　1、鑒別寄主反應(yīng)
　　昆諾阿藜和莧色藜上首先出現(xiàn)局部褪綠，然后系統(tǒng)斑駁；黃瓜表現(xiàn)局部褪綠斑，然后系統(tǒng)性黃斑或沿脈變色，植物停止生長(zhǎng)；煙草、自肋煙表現(xiàn)褪綠或壞死斑，有些株系產(chǎn)生系統(tǒng)性黃環(huán)、黃斑、線形病毒侵染后長(zhǎng)出的葉片無(wú)癥。
　　菜豆上表現(xiàn)微弱褪綠壞死斑，后系統(tǒng)性壞死、畸變。 999苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com
　　矮牽牛上表現(xiàn)局部褪綠斑或壞死環(huán)，接著系統(tǒng)明脈，褪綠環(huán)、線蟲(chóng)換行。但是，并非所有毒株（如啤酒花株系A(chǔ)rMV-H）都產(chǎn)生這些明顯癥狀，或所有傳染都能產(chǎn)生癥狀，基于這種原因，又由于ArMV通常是和草莓潛環(huán)斑病毒（SLRV）混合侵染，并具有相同的線蟲(chóng)介體且產(chǎn)生長(zhǎng)相似的癥狀，因此利用血清學(xué)鑒定更為準(zhǔn)確。
　　2、血清學(xué)檢測(cè)
　　從多克隆抗血清中獲得IgG進(jìn)行EUSA試驗(yàn)已廣泛用于病毒檢測(cè)上，單克隆抗體也已制備出來(lái)。有一種單克隆抗體能夠?qū)Ｒ粰z測(cè)來(lái)自比利時(shí)引起啤酒花“刺頭病”的ArMV-H，另一種單克隆抗體用于檢測(cè)從不同植物上分離到的11種ArMV株系，前者不能檢測(cè)德國(guó)ARMV-H，或者至少對(duì)其中有些分離物不能檢測(cè)。
　　3、免疫電鏡檢測(cè)
　　ArMV也可利用免疫電鏡時(shí)行檢測(cè)，甚至是對(duì)單個(gè)線蟲(chóng)檢測(cè)，這種方法比普通電鏡至少靈敏1000倍以上。
　　4、抗體修飾法
　　抗體修飾法也是一種常用檢測(cè)手段，利用這種方法可以將ArMV與同組其他病毒區(qū)分。
　　5、其它方法
　　侵染啤酒花的英國(guó)ArMV-H其分子結(jié)構(gòu)中含有額外的衛(wèi)星核酸，可應(yīng)用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)。另一種檢測(cè)方法是利用cDNA克隆斑點(diǎn)雜交試驗(yàn),這種方法至少已在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中建立. 中國(guó)苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com
　　防治方法：
　　防治ArMV的根本辦法是對(duì)植物材料進(jìn)行脫毒處理,并嚴(yán)格執(zhí)行檢疫證書(shū)管理制度,在線蟲(chóng)污染地區(qū)種植脫毒菌株,如果沒(méi)有其他輔助方法,還不能進(jìn)行徹底防治;輔助方法有土壤熏蒸或土地至少休耕一年,這樣可以較好地控制病害傳播.有些植物如Pholx paniculata有抗性品種,對(duì)于那些重要經(jīng)濟(jì)作物,培育抗病品種是一種積極的對(duì)策。
　　檢疫措施：
　　植物材料只能來(lái)自有嚴(yán)格檢疫證書(shū)管理制度的果園，幼株不帶土壤，以防傳毒線蟲(chóng)介體。
接種鑒別
　　寄主昆藜(Chenopodium ouinoa)或莧色藜(C.amaranticolor)接種后 4～6天出現(xiàn)局部褪綠，系統(tǒng)褪綠斑駁，頂枯。接種番杏后4～6天，接種葉片出現(xiàn)褪綠點(diǎn)，直徑約1～2mm，以后發(fā)展成中空的圓形壞死環(huán)斑，環(huán)紋細(xì)，然后融合成片，其后長(zhǎng)出的葉片無(wú)癥。
　　血清學(xué)檢測(cè)　瓊脂雙擴(kuò)散法：適宜檢測(cè)鑒別寄主的有病癥組織，植檢實(shí)驗(yàn)所抗血清的最適稀釋度用1/40～1/80，病汁用原液；SPA－ELISA：適宜測(cè)大量樣品，第一抗體用1/2000稀釋度的抗血清，第二抗體用1/1000，病汁用1/50～1/100；免疫電鏡：用1/1000抗血清誘捕，1/20修飾；檢測(cè)ArMV的具體程序?yàn)椋捍罅繕悠废冉?jīng)SPA－ELISA檢測(cè)，陽(yáng)性者再接種鑒別寄主，同時(shí)制片做電鏡觀察及瓊脂擴(kuò)散，其中3項(xiàng)為陽(yáng)性，確認(rèn)受ArMV侵染。 999中國(guó)苗木網(wǎng),999miaomu.com
有關(guān)檢疫規(guī)定
　　南芥菜花葉病毒是我國(guó)公布的《中華人民共和國(guó)進(jìn)境植物檢疫危險(xiǎn)性病、蟲(chóng)、雜草名錄》中規(guī)定的二類危險(xiǎn)性病毒，應(yīng)嚴(yán)格限制傳毒種苗的引進(jìn)數(shù)量。必須引進(jìn)的種苗應(yīng)由出口國(guó)出具檢疫證書(shū)，進(jìn)口后在檢疫圃內(nèi)試種、檢查和鑒定，對(duì)傳毒介體亦應(yīng)嚴(yán)格檢疫。

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