蘭花莖尖培養多從生長的植株上切取3~20毫米的莖,去掉苞片,用水沖洗干凈后,放入75%酒精中浸泡數秒,取出,轉入加有吐溫-20的漂白粉清液中浸泡約10分鐘,再用無菌水沖洗2~3次,置消毒濾紙中吸干水分。然后在無菌條件下,用解剖刀將外表的幼葉剝掉,切取0.5~0.8毫米大小的芽,接種在固體培養基上,保持室溫23~24C,并給予1500~2000勒克斯、每天12~14小時的光照,誘導原球莖發生。常用的培養基為MS和BS培養基。培養基中一般不使用2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),而常加人10%的椰子汁(CM)、帶乙酸(NAA)0.5~1.0毫克/升和6-芐基嘌呤(BA)0.1~1.0毫克/升。有條件的單位,應盡量使用液體振蕩培養,水平振蕩可快些,而立體振蕩應慢些,一般每分鐘2次即可。若無振蕩設備,可手動每天振蕩2~3次。振蕩不僅有利于原球莖球狀體形成,也有沖洗周圍組織的作用,防止組織的老化與枯死。通常在接種后不久,生長點組織先呈綠色,接著生長莖葉,以后在生長點基部的組織開始肥大,形成原球莖。原球莖可以不斷分割繼代培養,加速繁殖,直至達到所需的個數為止,然后再轉入分化培養。此時培養基中離子濃度應調低些,約15~20毫克/升較好,或在分化培養基中加人椰子汁等天然物質,原球莖便會很快再生成植株。而再分化的個體必須移人大的培養器內,繼續培養3~6個月,直至小苗有3~4片葉、3~4條根、高3~10厘米時才能移出,并將根部瓊脂清洗干凈后,栽入泥炭或蛭石中,但要注意保濕和弱光,并定期澆水施肥,促進生長。 苗木網,m.cqhuayin.com
(記者 佚名)
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