苗木組織培養中各種用于接種培養的材料 稱為外植體。包括苗木體的各種器官、組織、細 胞和原生質體等。組織培養所用的材料非常廣 泛，如鐵樹可采取根、莖、葉、花、芽和種子的子葉，有時 也利用花粉粒和花藥，其中根尖不易滅菌，一般 很少采用。
　　對于木本花卉來說，闊葉樹可在一二年生的
　　枝條上采集，針葉樹種多采種子內的子葉或胚
　　軸.草本苗木多采集莖尖。
　　在快速繁殖中，最常用的培養材料是莖尖， 通常切塊在0. 5 001左右，如果為培養無病毒苗 而采用的培養材料通常僅取莖尖的分生組織部 分，其長度在0.111皿以下。
　　培養材料的滅菌
　　取來的材料雖經選擇，外部總還有不少雜 菌，因此,接種前應進行表面滅菌。
　　①先將材料用流水沖洗干凈，最后一遍用 蒸餾水沖洗，再用無菌紗布或吸水紙將材料上的 水分吸干，并用消毒刀片切成小塊。
　　②在無菌環境中將材料放人70《酒精中浸 泡30?60 So
　　③再將材料移人漂白粉的飽和液或0.01% 升汞水中消莓5?10 min.
　　④取出后用無菌水沖洗三四次。
　　將已滅菡的材料，用無菌刀、剪、鑷等，在無
　　菌的環境下，剝去芽的鱗片、嫩枝的外皮和種皮 胚乳等，葉片則不需剝皮。然后切成0.2? 苗木網,999miaomu.com
　　5 0巾厚的小片，這就是外植體。在操作中嚴 禁用手觸動材料。
　　4. 4. 2 接種
　　接種是指把經過表面滅菌后的苗木材料切 碎或分離出器官、組織、細胞，轉放到無菌培養 基上的全部操作過程。整個過程均須無菌 操作。
　　①接種前先把接種室紫外燈打開，照射滅 菌20?30 !^⑴或提前0. 5?1 d用髙錳酸鉀和 甲醛混合液熏蒸。接種臺要提前開啟。
　　②操作人員進人接種室前需用肥皂水洗手 滅菌，換上經過消毒滅菌的白色工作服和拖鞋， 戴上工作帽和口罩。
　　③進人接種室后用70《的酒精棉球擦拭雙 手、超凈工作臺和需放上工作.臺的所有器具，防 止交叉污染。‘
　　④點燃酒精燈，將接種鉤、剪刀、鑷子放人 不銹鋼盤或瓷盤內燒灼，冷卻后備用。接種鉤、 剪刀、鑷子等不使用時浸泡在95‘冗的酒精中,用 時在火焰上滅菌，待冷卻后使用。每次使用前均 需進行用具滅菌。
　　⑤將外植體放入經燒灼滅菌的不銹鋼盤或 瓷盤內處理。如外植體為莖段的，將莖段上的葉 柄和莖的上下端剪掉一小節;培養脫毒苗的，在 雙筒解剖鏡下剝離切取大小0. 2?0.‘3 mm時莖 尖分生組織。
　　⑥燒灼瓶口和塞子，將培養瓶傾斜拿穩，打 開塞子，用鑷子將接種材料送人瓶內，用接種鉤 將材料壓人培養基中，燒灼瓶口和塞子,并上塞。 此過程中要注意避免細菌污染。-

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