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用葉片培養(yǎng)菊花苗

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來源：作者：發(fā)布時(shí)間：2013-07-21 16:54

植物的組織培養(yǎng)通常指所有類型植物的無性培養(yǎng)技術(shù)。可用來作為培養(yǎng)物的那部分，是植物的器官、組織或細(xì)胞，通稱為外植體。用于商品性生產(chǎn)中的外植體，一般取用植物體的某些器官：如莖尖、葉片，花等。組織培養(yǎng)技術(shù)可使繁殖系數(shù)大大提高，國外在七十年代已開始應(yīng)用于生產(chǎn)，國內(nèi)近年來也有用莖節(jié)和花蕾作為外植體培養(yǎng)成功的報(bào)道。江蘇農(nóng)學(xué)院園藝系和江都曹王林園場(chǎng)協(xié)作進(jìn)行的菊花快速繁殖研究，取用的外植體為葉片，具有取材不受季節(jié)限制的優(yōu)點(diǎn)。在工廠化育苗時(shí)，可與莖節(jié)、花蕾同時(shí)培養(yǎng)，以充分利用稀少的品種資源。而在無法取蕾和取莖節(jié)的季節(jié)，其葉片仍可作為唯一的材料來源。試驗(yàn)結(jié)果，葉片培養(yǎng)的分化率比花蕾略低，而分化系數(shù)與之相當(dāng)；與莖節(jié)相比，則二項(xiàng)指標(biāo)皆顯著高于莖節(jié)。葉片培養(yǎng)使用的基本培養(yǎng)基為MS（1982）培養(yǎng)基，添加瓊脂8克／升，蔗糖30克／升，PH調(diào)至5.6-6.0。分化培養(yǎng)基使用的激素為BA（6-芐基氨基嘌呤），和NAA（萘乙酸）初代培養(yǎng)使用的外植體為未老化的嫩葉。表面消毒用70％的酒精，然后進(jìn)一步用0.1％升汞滅菌。無菌水漂洗后，用濾紙吸干水份，剪成0.7至1平方厘米小塊，即可接種。培養(yǎng)室溫度為20～25℃，開始兩周為暗處理，其后為半光照，光照強(qiáng)度2000LUX（照度）。外植體接種后五天，可見中部隆起，邊緣增厚；兩周時(shí)膨大率達(dá)55.2％，并有11％出現(xiàn)愈傷組織，二十天時(shí)愈傷組織分化率達(dá)90％以上，個(gè)別處理開始分化出小芽和芽叢。接種二個(gè)月后統(tǒng)計(jì)，最佳處理外植體幼苗分化率達(dá)87.5％，每外植體分化芽數(shù)為8.14個(gè)，芽高一般達(dá)2-3厘米，可直接轉(zhuǎn)生根培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基可采用1／4MS培養(yǎng)基，添加激素NAA或IAA（吲哚乙酸）。培養(yǎng)十天后，生根率為83／100％，平均每苗根數(shù)達(dá)5-6條。入土成活率初步試驗(yàn)為84.2％，經(jīng)過生根培養(yǎng)的無根苗（部分根原基已形成）入土成活率也達(dá)87％，但細(xì)長的瘦弱苗入土成活率較低。從開花情況看，6月20日前人土的都能在11月份正常開花，稍后人土的也在12月陸續(xù)開花。在已開花的品種中，基本都保持了原品種的花色、花形等固有特征，而具有商品生產(chǎn)特性。其中"二喬"這一品種，在頂花保持原有性狀的同時(shí)，側(cè)花發(fā)生了綠色變異。從獲得的試管苗植株看，發(fā)生變異的部位均為頂花向下的第十節(jié)位，將其摘除后其上發(fā)生的二次側(cè)蕾仍為綠菊。

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