1、外植體的選取及預(yù)處理
　　⑴外植體選取
　　選取生長健壯、已發(fā)芽、長勢較好、無病害的生姜根狀莖作為外植體。
　　⑵材料預(yù)處理
　　取帶芽的枝條或鱗莖球莖，洗衣粉適量沖洗，然后扳取或用清潔剪刀剪取帶芽部位（約1cm×1cm大小），頂芽和腋芽、大芽和小芽分開。繼續(xù)用洗衣粉清洗10分鐘，清洗時需不停晃動。再用自來水沖洗干凈，置空培養(yǎng)瓶備用。
　　2、超凈工作臺無菌操作準備
　　檢查超凈工作臺，是否已開機滅菌，酒精燈、酒精瓶、升汞是否齊備、無菌水、培養(yǎng)瓶放置與位置、接種器械是否齊備與放置。
　　3、外植體消毒
　　⑴蒸餾水沖洗
　　外植體置于已殺菌開機的超凈工作臺上，新潔爾滅洗液消毒雙手，無菌蒸餾水清洗外植體2-3次，需隨時晃動。
　　⑵酒精消毒
　　75%酒精倒入裝外植體的容器內(nèi)，消毒外植體5-60s，時間長短視植物材料情況而定，一般幼嫩材料和室內(nèi)帶菌培養(yǎng)材料消毒時間短，老材料或室外材料消毒時間長。動作一定迅速，需晃動，然后將酒精倒去。整個時間計算以酒精傾倒開始至酒精倒出瓶外為止，
　　⑶升汞消毒
　　1%生汞倒入裝外植體的容器內(nèi)，消毒外植體5-10min，時間長短視情況而定。需晃動，在最后3min靜置，升汞注滿容器，將已灼燒的鑷子放入容器升汞內(nèi)浸泡。

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