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百合是世界上著名的切花品種之一,靠常規(guī)的小鱗莖分株方法繁殖,繁殖系數(shù)較低,1株百合每年只能得到1～3個(gè)小鱗莖[1]。有些種類可用鱗片扦插繁殖,但往往容易腐爛。另外,百合長期靠營養(yǎng)繁殖,容易感染病毒病,而影響百合品質(zhì)[2]。組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù),能夠迅速去除病毒和更新品種,具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和開發(fā)潛力,因而得到廣泛的應(yīng)用。近年來,很多花卉研究者進(jìn)行了百合的組織培養(yǎng)繁殖研究,所選的外植體有珠芽、幼莖段、葉片、鱗片等[36],主要側(cè)重于不同外植體對百合成苗和脫毒效果的研究,而關(guān)于利用組培苗葉片基部進(jìn)行快速繁殖和結(jié)鱗莖的研究,報(bào)道較少[7]。本試驗(yàn)以組培苗葉片基部為材料,對影響百合成苗和結(jié)鱗莖的兩類主要激素進(jìn)行了系統(tǒng)研究,省去了對外植體消毒處理的過程,減少了污染機(jī)率,為將來大規(guī)模生產(chǎn)百合小苗和鱗球莖在理論和實(shí)踐上提供參考依據(jù)。
1材料與方法
1.1材料
采用的百合品種為麝香百合(ＬｉｌｉｕｍｌｏｎｇｉｆｌｏｒｎｍＴｈｕｍｂ),英文名字為Ｅａｓｔｅｒｌｉｌｙ。
1.2方法
取百合鱗片經(jīng)消毒后,接種于ＭＳ培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)叢芽體,叢芽體繼代擴(kuò)增后,剝?nèi)惭咳~片基部進(jìn)行處理。 苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com
1.2.16ＢＡ和ＮＡＡ處理以ＭＳ為基本培養(yǎng)基,設(shè)計(jì)系列濃度的6ＢＡ和ＮＡＡ處理組合,6ＢＡ(ｍｇ/Ｌ)為:0,05,10,20;ＮＡＡ(ｍｇ/Ｌ)為:0,01,02,04。共16個(gè)處理組合,代號分別為:Ｄ11、Ｄ12至Ｄ44。每個(gè)處理組合接種3瓶,每瓶接10個(gè)葉片基部,長度約為1ｃｍ。2個(gè)月后觀察統(tǒng)計(jì),生根率以長根植株占成苗植株的百分?jǐn)?shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì);結(jié)鱗莖率以結(jié)鱗莖植株占成苗植株的百分?jǐn)?shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
1.2.2培養(yǎng)條件百合適宜的培養(yǎng)溫度為22～25℃,光照強(qiáng)度為1000～1500ｌｘ,每日光照10～16ｈ,相對濕度約為70%。
2結(jié)果與分析
不同濃度激素組合對葉片成苗和結(jié)鱗莖的處理效果見表1。
21成苗率
成苗率是指所出的苗數(shù)占接種的葉基部總數(shù)的百分?jǐn)?shù)。隨著6ＢＡ濃度的加大,成苗率呈降低趨勢。從4個(gè)濃度的6ＢＡ看,不加6ＢＡ的處理(Ｄ11、Ｄ12、Ｄ13、Ｄ14)成苗率最高,平均值為7625%,說明6ＢＡ對成苗有抑制作用。而適量的ＮＡＡ對成苗有一定的促進(jìn)作用,在這16個(gè)處理中,以Ｄ12處理成苗率最高。
22增殖系數(shù)
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組培百合的基本目標(biāo)之一是在短時(shí)間內(nèi)大量繁殖小苗和球莖,所以提高增殖系數(shù),可在短時(shí)間內(nèi)獲得更多的小苗或球莖。綜合這16個(gè)處理,以Ｄ22和Ｄ43處理增殖系數(shù)最高,分別為:17和20;其次為Ｄ12、Ｄ24和Ｄ34,均為16。
23結(jié)鱗莖率和鱗莖直徑
結(jié)鱗莖率以不加6ＢＡ的為最高,隨6ＢＡ濃度加大,結(jié)鱗莖率下降;鱗莖直徑也有類似的結(jié)果。表明6ＢＡ對結(jié)鱗莖率和鱗莖直徑有抑制作用。
24株高和生根率
株高隨著6ＢＡ濃度的加大而降低,從17ｃｍ降到06ｃｍ;生根率以不加6ＢＡ的為最高,平均值為905%,加大6ＢＡ濃度明顯抑制百合生根。這說明ＮＡＡ對株高和生根的促進(jìn)作用,隨著6ＢＡ濃度加大被抵消一部分或完全被抑制。
25小苗的栽培和處理
對于苗高3～4ｃｍ的已生根帶有鱗莖的小苗,可打開瓶口煉苗3～5ｄ,然后移入沙∶土(1∶1)的基質(zhì)中,保持溫度15～25℃,濕度70%以上,50%自然光照,可得到較高成活率。所用沙土最好是經(jīng)過滅菌的,如果用未滅菌的沙土,小苗莖部容易受細(xì)菌和霉菌的侵染而腐爛,影響成活率;用高溫滅菌的沙土混合物,小苗不容易得病,長勢較未滅菌的健壯,且成活率較高。對處于芽苗階段的小苗,可繼代至ＭＳ+ＮＡＡ003ｍｇ/Ｌ的培養(yǎng)基中,促進(jìn)其生長;對沒有生根的小苗可繼代至1/2ＭＳ+活性炭5%的生根培養(yǎng)基中,進(jìn)行生根培養(yǎng),然后再進(jìn)行移栽。 苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com
3小結(jié)與討論
綜合以上試驗(yàn)結(jié)果得出:6ＢＡ主要有提高增殖系數(shù)的作用,但抑制結(jié)鱗莖和減小鱗莖直徑,同時(shí)抑制植株長高和生根,這與趙祥云[5]的研究結(jié)果相似。ＮＡＡ有促進(jìn)成苗、植株長高和生根的作用,但過多ＮＡＡ?xí)箽馍龆?不利于小苗生長。從成苗和結(jié)鱗莖率角度看,本試驗(yàn)最優(yōu)組合為Ｄ12;從提高增殖系數(shù)角度看,以Ｄ43最好;如果把成苗和提高增值系數(shù)結(jié)合起來,則Ｄ22最優(yōu)。所以適當(dāng)?shù)卣{(diào)整6ＢＡ和ＮＡＡ的濃度比,才能得到理想的結(jié)果。本試驗(yàn)對影響百合成苗和增殖的2種激素進(jìn)行了初步研究,從中選出了利于成苗和增殖的最優(yōu)組合。王愛勤[7]等認(rèn)為糖的濃度對試管結(jié)鱗莖有影響,關(guān)于糖濃度及如何調(diào)控和增加其他一些激素使百合在試管內(nèi)快速結(jié)鱗莖和增大鱗莖直徑等技術(shù),有待于進(jìn)一步研究。 999苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com
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