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寒蘭的雜交與無菌播種技術(shù)

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來源：作者：發(fā)布時(shí)間：2013-07-27 11:53

日本岡田拓郎先生有關(guān)寒蘭的雜交與無菌播種的研究結(jié)果。

    1、雜交組合類型與種子特性

    寒蘭進(jìn)行以下3種類型的雜交：

    A型：青寒蘭品種之間：青寒蘭×福娘；

    B型：紅花系品種之間：武陵（粉紅花系）×錦旗（紅花系）；

    C型：自交組合：武陵×武陵。

    （1）雜交與采種

    芽花后3～4天雌蕊和雄蕊發(fā)育最充實(shí)，足進(jìn)行雜交的最佳時(shí)期。雜交的方法足，先進(jìn)行除雄，即將花柱頂部的花粉塊取出除去，再將父本的花粉塊放入柱頭的塌陷處。原則上1盆有5株以上的生長(zhǎng)旺盛的母本植株，只結(jié)1個(gè)蒴果。

    （2）雜交后的子房發(fā)育與栽培管理

    雜交后10～15天，若發(fā)現(xiàn)子房開始發(fā)育、表面膨大，確認(rèn)為授粉成功。4～6個(gè)月后子房達(dá)到最大。雜交后植株要消耗營(yíng)養(yǎng)，要注意栽培管理。雜交后6個(gè)月內(nèi)要多施肥，為保證生育正常，十分注意灌水、通風(fēng)、保溫等措施。9月以后隨著天氣的涼爽，恢復(fù)到原來的栽培管理。雜交后到種子完熟（蒴果開裂）需10～12個(gè)月，也會(huì)受到母本植物的管理狀況的影響。

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    蘭花種子采收后，會(huì)發(fā)生一些生理、生態(tài)的變化，種子有后熟作用。對(duì)完熟寒蘭種子在貯藏中胚的變化的調(diào)查后表明，采種時(shí)的胚的長(zhǎng)度是胚軸的1.3倍，1年后為1.8倍，2年后為2.0倍，3年后約為2.5倍，說明種子在貯藏時(shí)胚在不斷伸長(zhǎng)（在冰箱內(nèi)5～7℃貯藏）。

    2、無菌播種

    （1）播種的方法

    將適量種子放入含有0.1N的KOH溶液的試管中，用手指按住試管口，充分搖動(dòng)，約5分鐘分離的種子分散在處理液中。最適的處理時(shí)間，依雜交組合種類的不同有差別，約5～15分鐘。

    接著用水充分洗去處理液，再用漂白粉上清液（5%溶液、3分鐘）進(jìn)行滅菌，種子再一次用水洗凈后播種于播種培養(yǎng)基中。

    播種用的容器為300ml的三角燒瓶，塞子是有孔的、用脫脂棉塞好的橡皮塞。由于東洋蘭種子的發(fā)芽對(duì)空氣的要求不是必要的，所以播種后在橡皮塞上部用加熱溶解的石蠟滴下密封。

    播種后將培養(yǎng)容器置于恒溫箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：溫度為23±5℃、光照5000Lx、光照時(shí)間14小時(shí)。

    （2）播種后胚的伸長(zhǎng)及發(fā)芽 999苗木網(wǎng),m.cqhuayin.com

    寒蘭種子播種后8個(gè)月左右才發(fā)現(xiàn)有發(fā)芽跡象。這時(shí)，種子表皮破裂，該時(shí)期被稱為發(fā)芽期。發(fā)芽一直持續(xù)到播種后10～12個(gè)月，播種后9個(gè)月以后發(fā)芽種子的胚及發(fā)芽形成的原球體出現(xiàn)褐變，防止褐變的方法還有待于研究。

    （3）根狀莖的伸長(zhǎng)

    寒蘭的根狀莖轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基，根狀莖不斷地增殖，從根狀莖分化出無數(shù)側(cè)枝，生姜狀根向下伸長(zhǎng)。在培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，經(jīng)數(shù)年根狀莖仍能繼續(xù)伸長(zhǎng)，但基本上不分化芽。發(fā)現(xiàn)有分化的芽后，轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上，幼芽很少褐變，經(jīng)1次繼代培養(yǎng)的根狀莖形成的總根狀莖數(shù)與不轉(zhuǎn)接相比，增加了13倍。因此，根狀莖發(fā)芽后，應(yīng)盡早轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基中。

    與春蘭相同，希望寒蘭根狀莖轉(zhuǎn)接到萌芽用培養(yǎng)基中分化出苗，但在萌芽用的基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)沒有萌芽。在基本培養(yǎng)基中添加BA2.5mg/L能分化出芽。在添加趾的培養(yǎng)基中，接種約20天后，根狀莖的先端開始形成葉原基，60天后形成幼葉，并且肉眼可見。之后，不但在根狀莖的先端，而且在根狀莖側(cè)面也開始分化出芽，1個(gè)根狀莖可分化出7～10個(gè)腋芽，并形成葉。與根狀莖先端形成芽不同，根狀莖側(cè)面形成的芽依不同雜交組合類型有所差異。試管苗的苗高達(dá)到10～15厘米時(shí)，可取出試管苗移栽到盆缽中培育，經(jīng)5～7年的栽培管理植株可開花。

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