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菌絲尖端脫毒技術(shù)

來源：作者：發(fā)布時間：2013-07-12 10:50

　　嚴格地說，一般的組織分離并不能達到菌種脫毒的目的，這是由于子實體在生長中后期，攜帶病毒、病菌的概率相當高，故脫毒效果不明顯。而將食用菌尖端生長點進行脫毒，效果理想。具體的脫毒方法如下:使用規(guī)格為90毫米或110毫米的培養(yǎng)皿，或用規(guī)格為25毫米×200毫米的大型試管。先按常規(guī)制備母種培養(yǎng)基，裝入三角瓶，用棉塞封口，加牛皮紙包封，同時將培養(yǎng)皿洗凈后用牛皮紙包好。二者同時進行滅菌處理。滅菌器內(nèi)壓力為零時，取出滅菌物，放入接種箱。打開牛皮紙包封，一手持培養(yǎng)皿，一手持三角瓶，利用手指調(diào)控使培養(yǎng)皿上蓋開啟約1～2厘米，倒入培養(yǎng)基液體10～20毫升，蓋嚴。將培養(yǎng)皿平置，冷卻后成一光滑平面，俗稱“平板”。“平板”冷卻至30℃以下時，接入待脫毒菌種。接種方法：挑取米粒大小的一塊種源，接入“平板”邊緣。接種后置于規(guī)定的溫度下進行培養(yǎng)。當菌絲萌發(fā)至2厘米長時，用尖刀接種工具切取菌絲尖1毫米左右，接入新制“平板”上。此為一次脫毒。一般可連續(xù)脫毒3～4次。脫毒次數(shù)越多，脫毒效果就越有保證。

　　

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